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人堿性磷酸酶（ALP）化學(xué)發(fā)光mianyi檢測(cè)試劑盒基本原理及操作步驟
  • 發(fā)布日期：2019-06-21     信息來(lái)源：      瀏覽次數(shù)：2263

      • 產(chǎn)品描述

        英文名稱  Human ALP (Alkaline Phosphatase) CLIA Kit
        中文名稱    人堿性磷酸酶(ALP)化學(xué)發(fā)光mianyi檢測(cè)試劑盒  
        貨號(hào)  E-CL-H0138c  種屬  Human/人
        規(guī)格  96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
        檢測(cè)方法    雙抗體夾心法  
        檢測(cè)范圍  3.125~200ng/mL  靈敏度  1.875ng/mL

      基本原理

      本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Human ALP抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的ALP會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Human ALP抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗Human ALP抗體與結(jié)合在包被抗體上的Human ALP結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成mianyi復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過(guò)氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光mianyi分析儀測(cè)定化學(xué)發(fā)光值（CL），ALP濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān)，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中ALP的濃度。

      操作步驟

      1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各 100μL，37℃孵育90分鐘

      2. 倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入 100μL  生物素化抗體工作液，37℃孵育 60 分鐘

      3. 洗滌 3 次

      4. 加入 100μL 酶結(jié)合物工作液， 37℃孵育 30 分鐘

      5. 洗滌 5 次

      6. 加入 100μL 底物溶液， 37℃孵育 5 分鐘左右

      7. 讀數(shù)

      8. 結(jié)果計(jì)算